ВЗЯТИЕ, УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ДОСТАВКИ МАТЕРИАЛА ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ
ПЦР ИССЛЕДОВАНИЙ
УРОГЕНИТАЛЬНЫЙ ХЛАМИДИОЗ
Материал для исследования: соскоб из уретры или цервикального канала, секрет предстательной железы, осадок мочи. У новорожденных в качестве материала для исследования используют соскоб из конъюнктивы глаз и задней стенки глотки. У девочек в качестве материала для исследования используют соскоб из вульвы, у мальчиков — мочу.
Подготовка пациента, взятие биологического материала и условия его транспортировки: за 10 дней до взятия материала на исследование необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные процедуры. В связи с тем, что Clamydia trachomatis является внутриклеточным паразитом и размножается только внутри клеток цилиндрического эпителия уретры или цервикального канала. Для получения адекватного результата необходимо, чтобы исследуемый материал содержал как можно большее количество эпителиальных клеток и минимальное количество слизи и примесей крови. Присутствие в исследуемом материале большого количества слизи и примесей крови могут привести как к ложноположительным, так и ложноотрицательным результатам.
Особенности взятия материала из уретры
* Перед взятием материала пациенту рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 1,5-2 часов;
* Непосредственно перед взятием материала наружное отверстие уретры необходимо обработать тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором;
* При наличии гнойных выделений соскоб рекомендуется брать через 15-20 мин после мочеиспускания, при отсутствии выделений. Необходимо провести массаж уретры с помощью зонда для взятия материала;
* У женщин перед введением зонда в уретру проводится ее массаж лобкового сочленения;
* В уретру у женщин зонд вводится на глубину 1,0-1,5 см, у мужчин — на 3-4 см и затем делается несколько вращательных движений; у детей материал для исследования берут только из наружного отверстия уретры; После взятия материала зонд опускается в пробирку с транспортной средой.
После внесения зонда в транспортную среду он несколько раз вращается, а затем удаляется из пробирки. Пробирка плотно закрывается. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до его доставки в лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо заморозить при -20.0С. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.
Особенности взятия материала из цервикального канала
* перед взятием материала необходимо удалить ватным тампоном слизь и затем обработать шейку матки стерильным физиологическим раствором;
* зонд вводится в цервикальный канал на глубину 05-15 см;
* при наличии эрозий цервикального канала необходимо их обработать стерильным физиологическим раствором, и материал следует брать на границе здоровой и измененной ткани;
* при извлечении зонда необходимо полностью исключить его касание со стенками влагалища;
После взятия материала зонд опускается в пробирку с транспортной средой. После внесения зонда в транспортную среду он несколько раз ротируется, а затем удаляется из пробирки. Пробирка закрывается и маркируется. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до момента его доставки в лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо заморозить при -20.0С. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.
Особенности взятия секрета предстательной железы
Перед взятием секрета простаты головка полового члена обрабатывается стерильным ватным тампоном, смоченным физиологическим раствором. Секрет простаты берется после предварительного массажа простаты через прямую кишку. Врач проводит массаж с надавливанием несколькими энергичными движениями от основания к верхушке. Затем из кавернозной части выдавливается простатический секрет. Транспортировка биологического материала должна проводиться только в сумке-холодильнике.
Особенности взятия (сбора) мочи
Мочу собирают утром натощак после сна или не ранее чем через 2-3 часа после последнего мочеиспускания. Утренняя моча отстаивается в течение 1 часа, затем осторожно сливается, оставляя лишь придонную часть — около 10 мл. Этот остаток сливают в центрифужную пробирку и центрифугируют. Затем надосадочную жидкость снова сливают, а осадок (без жидкости) зондом переносят в пробирку для ПЦР. До получения осадка мочу нельзя охлаждать или замораживать.
Особенности взятия материала из задней стенки глотки
Одноразовый зонд вводят за мягкое небо в носоглотку и проводят по задней стенке глотки. После взятия материала зонд опускается в пробирку с транспортной средой ДНК-ЭКСПРЕСС. После внесения зонда в транспортную среду он несколько раз ротируется, а затем удаляется из пробирки. Пробирка закрывается и маркируется. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до момента его доставки в лабораторию более 2-х часов, пробирку необходимо заморозить при -20.0С. Транспортировка биологического материала должна проводиться только в сумке-холодильнике. В замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.
Особенности взятия материала из конъюнктивы глаз
При наличии обильного гнойного отделяемого его убирают стерильным ватным тампоном, смоченным физиологическим раствором. Соскоб берут с внутренней поверхности нижнего века движением к внутреннему углу глазной щели. При взятии соскоба необходимо придерживать веко руками, чтобы при моргании ресницы не касались зонда. После взятия материала зонд опускается в пробирку с транспортной средой ДНК-ЭКСПРЕСС. После внесения зонда в транспортную среду он несколько раз вращается, а затем удаляется из пробирки. Пробирка плотно закрывается. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до его доставки в лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо заморозить при -20.0С. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.
УРОГЕНИТАЛЬНЫЙ МИКОПЛАЗМОЗ
Материал для исследования отделяется из уретры, влагалища, цервикального канала, моча (центрифугат утренней первой и средней порций), секрет простаты, сперма. Подготовка пациента, взятие биологического материала и условия его транспортировки см. урогенитальный хламидиоз.
Особенности взятия материала из влагалища
Материал должен быть взят до проведения мануального исследования. Зеркало перед манипуляцией можно смочить горячей водой, применение антисептиков для зеркала противопоказано. Выделения из влагалища собирают стерильным одноразовым зондом с заднего нижнего свода или с патологически измененных участков слизистой оболочки и помещают в пробирку с транспортной средой «ДНК-ЭКСПРЕСС». У девушек взятие материала осуществляют со слизистой оболочки преддверия влагалища, а в отдельных случаях — с заднего свода влагалища через гименальные кольца. После внесения зонда в транспортную среду он несколько раз ротируется, а затем удаляется из пробирки. Пробирка закрывается и маркируется. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до его доставки в лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо заморозить при -20.0С. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.
ГОНОРЕЯ
Материал для исследования отделяется из уретры, цервикального канала, секрета предстательной железы, осадка мочи. Подготовка пациента, взятие биологического материала и условия его транспортировки см. урогенитальный хламидиоз.
За 10 дней до взятия материала на исследование необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные процедуры. Материал для исследования у женщин следует брать перед менструацией или через 1-2 дня после окончания. Перед взятием материала необходимо воздержаться от мочеиспускания в течение 3-4 часов и половых сношений. Женщины накануне обследования не должны проводить туалет наружных половых органов и спринцевание. Исследуемый материал должен быть без примесей крови. Не следует для исследования брать уретральные выделения, которые свободно стекают.
Секрет простаты следует брать только после окончания острых явлений простатита.
При вялотекущей и хронической гонорее перед исследованием необходимо провести провокацию.
Методы провокации при гонорее:
* биологическая: введение гоновакцины (500 млн. микробных тел) взрослым однократно, внутримышечно, детям старше 3-х лет — 100-200 млн. микробных тел; детям до 3-х лет введение гоновакцины не рекомендуется;
* термическая: применение в течение 3-х дней диатермии с абдоминально-вагинально-сакральным расположением электродов по 30, 40, 50 мин или индуктотермии по 10, 15, 20 мин; взятие материала лучше всего проводить из уретры, цервикального канала через 1 час после каждого прогревания;
* механическая: наложение металлического колпачка на шейку матки женщин на 4 часа, проведение массажа уретры у мужчин на буже в течение 10 мин;
* алиментарная: употребление соленой, острой пищи и алкоголя за 24 часа до исследования.
Взятие материала проводится после провокации и через 24-48-72 часа.
Для получения наиболее достоверных результатов требуется проведение повторных исследований.
ТРИХОМОНИАЗ
Материал для исследования отделяется из уретры (у мужчин), влагалища, секрета простаты. Подготовка пациента, взятие биологического материала и условия его транспортировки см. урогенитальный хламидиоз, урогенитальный микоплазмоз.
ТУБЕРКУЛЕЗ (нелегочные локализации)
Материал для исследования: моча, мазки из цервикального канала, уретры.
Подготовка пациента, взятие биологического материала и условия его транспортировки: за 10 дней до взятия материала на исследование необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные процедуры.
ЗАБОЛЕВАНИЯ ОРГАНОВ ДЫХАНИЯ Ассоциированные с Mycoplasma pneumoniae
Материал для исследования: Мазок из носоглотки.
Взятие мазка проводится натощак или не ранее, чем через 2-4 часа после еды. При взятии материала необходимо яркое освещение, пациент сидит против источника света, корень языка прижимают шпателем, материал берут стерильным зондом, не касаясь языка, слизистой оболочки щек и зубов и опускают в пробирку с транспортной средой «ДНК-ЭКСПРЕСС». После взятия материала зонд опускается в пробирку с транспортной средой ДНК-ЭКСПРЕСС. После внесения зонда в транспортную среду он несколько раз вращается, а затем удаляется из пробирки. Пробирка закрывается. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до его доставки в лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо заморозить при -20.0С. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.
ГАСТРОДУОДЕНАЛЬНЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ (гастрит, язвенная болезнь желудка или двенадцатиперстной кишки), АССОЦИАЦИОННЫЕ С Helicobacter pylori
Материал для исследования: биоптаты антрального отдела желудка, биоптаты двенадцатиперстной кишки, биоптаты десен, мазки из зубодесневого кармана.
Особенности взятия биопсийного материала. Взятие биопсийного материала проводится во время эндоскопического исследования. Перед началом противохеликобактерной терапии биопсийный образец берется из антрального отдела желудка. При контроле лечения взятие биопсийного образца проводится не ранее чем через 4 недели после проведения противохеликобактерной терапии из тела желудка. Взятый биопсийный образец опускается в стерильную сухую пробирку (эппендорф) и немедленно доставляется в лабораторию. Для более длительного хранения возможна заморозка взятого биопсийного материала при температуре -20.0С.
Особенности взятия биоптатов десен, мазков из зубодесневого кармана и слюны: Биопсийный материал из десен, мазки из зубодесневого кармана и слюна берутся у пациентов с гастродуоденальной патологией в анамнезе при наличии у них гингивитов и пародонтоза. Взятый биопсийный образец опускается в стерильную сухую пробирку (эппендорф) и немедленно доставляется в лабораторию. Для более длительного хранения возможна заморозка взятого биопсийного материала при температуре -20.0С. Мазки из зубодесневого кармана собираются в стерильную пробирку (эппендорф) с физиологическим раствором. И здесь пробирки могут храниться в холодильнике (+4.0С- +6.0С) не более 12 часов, которые транспортировка осуществляется в сумке-холодильнике.
ВИРУСНЫЕ ИНФЕКЦИИ
Herpes Simplex virus II; Citomegalovirus; H. papiloma virus 16, 18
Исследуемый материал: мазки При герпетической инфекции соскобы лучше всего брать с генитальных поражений (везикул, язв). При отсутствии генитальных поражений соскоб берется из цервикального канала. При диагностике цитомегаловирусной инфекции материалом для исследования могут быть, мазок с задней стенки глотки, соскобы из влагалища, уретры и цервикального канала, слюна, спиномозговая жидкость. При диагностике папилломавирусной инфекции материалом для исследования может быть мазок из носоглотки, из конъюнктивы глаза, соскоб из цервикального канала, шейки матки, также слизистых (неороговевающий эпителий). Взятие биологического материала по возможности должно проводиться в период обострения инфекции. урогенитальный хламидиоз, урогенитальный микоплазмоз.
Herpes Simplex virus I; Herpes Simplex virus II; Herpes Simplex virus VI Citomegalovirus; Epstein Barr virus
Исследуемый материал: Нативная кровь.
Подготовка пациента, взятие биологического материала и условия его транспортировки. Кровь на исследование желательно брать натощак. Венозная кровь в количестве 1-1,5 мл отбирается в стерильную пробирку (эппендорф) объемом 1,5 мл с раствором ЭДТА. Пробирка с кровью может храниться в холодильнике (+4.0С- +6.0С) не более 24 часов. Пробирку не замораживать. Исследование будет проводиться из плазмы и форменных элементов крови.
HBV-ДНК: Определение концентрации HBV-ДНК методом конкурентной ПЦР HCV-РНК (полуколичественная оценка) + anti-HCV; HCV-РНК с определением генотипа HCV + anti-HCV.
Исследуемый материал: Сыворотка крови.
Исследованию подлежит сыворотка, которая содержит примеси эритроцитов. В случае необходимости длительного хранения исследуемого образца крови (только для гепатитов B, C) необходимо отобрать 1 мл сыворотки или плазмы крови и хранить ее при температуре -20.0С не более 2-х недель
КОМПЛЕКСНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ НА БАКТЕРИАЛЬНЫЙ ВАГИНОЗ
Исследуемый материал: Мазки из заднего нижнего свода влагалища.
Для комплексной диагностики бактериального вагиноза необходимо: Взять соскоб эпителиальных клеток с заднего или бокового свода влагалища на отдельное одноразовое предметное стекло, подписать и высушить его. Хранить стекло при комнатной температуре. Удалить слизь и взять соскоб эпителиальных клеток с заднего или бокового свода влагалища одноразовым зондом-щеткой типа цервикс-браш в ПЦР-пробирку с реактивом «ДНК-ЭКСПРЕСС». Хранить пробирку в морозильной камере при температуре минус 20.0С до 10 дней.